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Step 5量化分析:显微镜下直接计数或者使用RNAscope® SpotStudio™ or HALO自动化图像分析软件对每一个细胞中的RNA单分子信号进行精确定量分析。

RNAscope®是一项新RNA原位杂交技术,可在组织和细胞中检测目标RNA。该技术基于其独特的探针设计与背景抑制技术,并且融合传统RNA原位杂交技术与FISH技术的优点,在单细胞水平,实现了单RNA的可视化,代表了RNA原位杂交领域的一项重大进步是目前及其精准的RNA检测技术。

RNA 表达水平高度动态,并集成了遗传和表观遗传学的调控机制,可以作为分标记物指示细胞的功能状态。近年来转录组分析在癌症研究的广泛已证明,RNA 与蛋白质一样可以作为临床诊断治疗评估及预后预测的生物指标。为了充分利用RNA作为生物标记物的这些潜力迫切需要开发出有效方法来常规检测RNA RNAscope®正是可满足这一需求的技术可以形态学基础绘制真实重要信号通路和关联网络











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Step 4可视信号形成:在透视光学显微镜或者多光谱成像系统的观测下,每一个目标RNA分子以一个点状信号的形式呈现。
Step 2杂交:RNAscope®针对靶基因设计的20Z型目标探针与目标RNA杂交。
Step 3信号放大:RNAscope®检测试剂盒通过信号扩增序列与显色标记有序互补结合从而扩大信号。
RNAscope®工作流程 

Step 1透化:通过RNAscope®预处理试剂盒处理载玻片上固定好的组织或细胞,以暴露目标RNA

Step 4可视信号形成:在透视光学显微镜或者多光谱成像系统的观测下,每一个目标RNA分子以一个点状信号的形式呈现。