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RNAscope您需要哪些试剂?

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RNAscope原位杂交染色流程主要分为五个大的步骤:
1.1.样本预处理:将组织切片或者细胞片进行预处理,以暴露目的RNA分子;
2.2.探针杂交:在40℃条件下使探针与目的RNA分子杂交;
3.3.信号放大及检测:通过一系列寡核苷酸的互补配对结合,实现逐级放大,并显示每一个目的RNA分子;
4.4.结果观察:RNA可视化。每一个点代表一个目的RNA分子,可在明场显微镜或荧光显微镜下观察结果;
5.5.数据分析:根据实验目的,选择不同的数据分析方法,可以使用RNAscope®SpotStudio™进行数据分析。
对应ACD的产品主要有以下三大类:
1.1.RNAscope探针 :目前以后超过8000条目录探针,如果您的目的RNA不在该目录探针列表中,可以进行特殊定制。
2.2.RNAscope reagent Kit试剂盒 :包含用于样本预处理的预处理试剂盒、以及用于信号放大及检测过程的检测试剂盒和清洗缓冲液试剂盒。
3.3.其他产品:包括ACD对照切片 (人Hela细胞FFPE切片、小鼠3T3细胞FFPE切片)、HybEZ™杂交系统、Immedge™阻水笔、RNAscope®SpotStudio™数据分析软件等。
RNAscope可以实现手工RNA ISH检测,也可以在Leica Bond RX平台、Ventana Discovery XT平台、VentanaDiscovery Ultra平台上实现自动化RNA ISH检测。
因此,完成完整的RNAscope实验,您需要购买哪些试剂?

第一步:选择检测类型:根据实验条件选择手工检测或自动化检测。选择检测类型:可见光单染(棕色)、可见光单染(红色)、可见光双染(红色和绿色)、荧光多重染色;
第二步:选择靶探针:查询您的目的RNA是否在ACD目录探针列表。如果有可以直接选择;如果没有,可以进行特殊定制;
第三步:选择ACD对照切片和对照探针:跟进第一步检测类型,选择对应的对照探针;
第四步:选择其他产品:如HybEZ™杂交系统、Immedge™阻水笔、RNAscope®SpotStudio™数据分析软件等;
第五步:实验前的准备:下载protocol以及checklist,观看培训视频,熟悉RNAscope实验原理与流程,确保拥有RNAscope实验所需要的任何材料与物品。
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